Pewarnaan Gram Negatif. Dalam proses ini olesan bakteri yang sudah terfiksasi dikenai larutan larutan berikut. Bakteri gram positif dan bakteri gram negatif dibedakan berdasarkan struktur dinding selnya.
Pewarnaan gram adalah langkah utama untuk identifikasi awal dan klasifikasi bakteri menjadi dua kelompok yaitu gram positif dan gram negatif. Pewarnaan diferensial lainnya ialah pewarnaan ziehl neelsen yang memilihkan bakterinya menjadi kelompok kelompok tahan asam dan tidak tahan asam. Ini menodai dinding sel bakteri secara berbeda yang membedakan bakteri dengan memberi warna ungu pada bakteri gram positif dan warna merah muda pada bakteri negatif.
Pewarnaan gram atau metode gram adalah salah satu teknik pewarnaan yang paling penting dan luas yang digunakan untuk mengidentifikasi bakteri.
Zat pewarna kristal violet sodium larutan alkohol bahan pemucat dan zat pewarna tandingannya berupa zat warna safranin atau air fuchsin. Bakteri gram positif memiliki peptidoglikan yang tebal 90 dari dinding sel dan berwarna ungu saat diwarnai dengan pewarnaan gram. Akibat struktur dinding sel yang berbeda menimbulkan respon yang berbeda ketika dilakukan pewarnaan gram. Pewarnaan gram atau disebut juga metode gram merupakan metode pewarnaan yang biasa digunakan untuk membedakan dan mengklasifikasikan spesies bakteri menjadi dua kelompok besar yaitu bakteri gram positif dan bakteri gram negatif.